【中國制藥網(wǎng) 技術(shù)文章】制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念是指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其他用途。制備色譜技術(shù)則是用于分離提取天然產(chǎn)物有效成分的一種重要技術(shù)。

　　業(yè)內(nèi)人士表示，制備色譜技術(shù)的出現(xiàn)使色譜技術(shù)與經(jīng)濟利益建立了聯(lián)系，其已經(jīng)成為現(xiàn)代科學研究和生產(chǎn)實踐中分離多組分化合物的一個重要技術(shù)手段，尤其是在自然界中天然產(chǎn)物活性成分的提取和純化中起著重要作用。

　　在制備色譜技術(shù)中，薄層色譜技術(shù)屬于液相色譜技術(shù)的范疇，經(jīng)典的制備型薄層色譜設(shè)備簡單，投資較少，但處理量較小，通常用來分離毫克級的樣品，且被分離的化合物需要從薄層板上刮下，并將其從吸附劑中提取出來。

　　常壓柱色譜應用較為廣泛，技術(shù)也相對成熟。主要包括吸附柱色譜、分配柱色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、干柱色譜等。其中，吸附柱色譜中的硅膠吸附柱色譜是目前應用較為廣泛的一種常壓柱色譜。

　　加壓制備色譜技術(shù)是一種使用較為廣泛的色譜分離純化技術(shù)，它是將分離填料填裝在色譜柱內(nèi)，用液體流動相進行洗脫，利用藥物中不同活性成分與填料相互作用力的差異來分離混合物。

　　高速逆流色譜是逆流色譜中具實用意義的一類，高速逆流色譜分離柱的固定相無載體，消除了載體對分離過程的影響，適合分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)，且高速逆流色譜超載能力強，進樣量大，尤其適用于制備性分離，并同時具備高回收率。

　　模擬移動床色譜技術(shù)主要應用于石油化學工業(yè)，超臨界流體色譜則是對氣相色譜和液相色譜的補充，是根據(jù)待測物在固定相和流動相兩相中的分配系數(shù)不同，繼而實現(xiàn)對待測物的先后洗脫。

　　對于制備色譜技術(shù)，很多用戶也有許多疑問。比如做柱層析時(國產(chǎn)大孔吸附樹脂)，怎么才能把洗脫液中的樹脂殘留物處理干凈?

　　專家認為，大孔吸附樹脂在使用前，一般需要進行處理，方法包括用色譜純的甲醇或乙睛洗到?jīng)]有吸收;或樹脂用乙醇浸泡2天，丙酮浸泡2天，然后用常規(guī)的酸、堿洗，再用丙酮回流兩小時。

　　制備色譜柱該如何測柱效?業(yè)內(nèi)分析，可以選擇幾種物質(zhì)，苯、甲苯、萘、蒽等的衍生物上柱，流動相一般用65-80%的甲醇\水，測定猴根據(jù)保留時間計算塔板數(shù)。不過，由于制備色譜的管路死體積一般比較大，很難得到和供應商相同的柱效，建議在制備住開始使用時在自己的色譜上測一下柱效，再定期檢測柱效進行比較。

　　反相色譜分離后，如何快速從流動相中得到產(chǎn)品?可以考慮現(xiàn)在低溫下，減壓旋蒸出去其中的有機溶劑，然后用萃取的方法(如乙醇、氯仿萃取等)把產(chǎn)品萃取出來，然后再低溫再旋蒸，這樣就可以不將溫度升高而得到產(chǎn)品。

　　如果要直接蒸掉流動相，水泵的真空度要注意(檢查氣密性)，否則蒸水會很慢。一般比較好的泵在60~70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80~90度才行，這樣容易暴沸，導致樣品損失，溫度太高也會引起物質(zhì)變性。