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提高RT-PCR反應體系的靈敏度方式解讀2024/8/19
RT-PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)，也稱為逆轉錄PCR，是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術...
PCR反應擴增產物平端連接法實驗詳述2024/8/12
實驗原理：平頭連接是將制備好的平頭載體和補平或削平的PCR產物直接進行連接。載體可用EcoRV或SmaI切成平頭；PCR產物純化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用該酶所具有的3’→5...
實時熒光定量 PCR 引物和探針的儲存2024/8/5
聚合酶鏈式反應(PCR)是分子生物學領域功能強大的技術之一。實時熒光定量PCR是在標準PCR技術基礎上演變而成，常用于定量樣本中的DNA或RNA。利用熒光探針或熒光DNA結合染料，采用實時熒光定量PC...
生化試劑盒應用注意事項匯總2024/7/30
通常生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑，前者特別適用于半自動生化分析儀和小型自動生化分析儀，使用方便，缺點是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比，雙試劑提高了抗干擾能力，具有穩(wěn)定性能較好，可消除樣品自身空白等...
細胞培養(yǎng)優(yōu)點與基本要求匯集2024/7/22
細胞常規(guī)培養(yǎng)是在細胞房中進行，在超凈工作臺或生物安全柜中，把細胞處理好，根據需要加入細胞培養(yǎng)基，放入細胞培養(yǎng)瓶/皿或細胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：1.研究...
PCR反應各種問題解答2024/7/15
聚合酶鏈反應(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優(yōu)點。PCR反應過程常出現...
PCR反應擴增產物出現多條帶(雜帶)解決方案2024/7/8
聚合酶鏈反應(PCR)技術是在體外進行的由引物介導的酶促DNA擴增反應。PCR的原理是在模板DNA、PCR引物、四種脫氧核糖核苷酸(dNTP)及適當濃度的Mg2+存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的體外...
ELISA實驗標準曲線的技術疑難解讀2024/7/1
標準曲線法也稱為外標法或直接比較法，是一種簡便、快速的定量方法，在ELISA實驗中比較常用的一種分析方法。標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果，甚至是關系到實驗的成敗。那么在ELISA實驗中，這一...
合成培養(yǎng)基的主要成分陳述2024/6/24
細胞培養(yǎng)基的種類很多，按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基)，按其物質狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌，液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提...
小鼠ELISA試劑盒試驗問題原因追蹤2024/6/17
酶聯免疫吸附測定（ELISA）是應用廣泛的免疫測定類型。ELISA是一種快速測試，用于檢測樣品中抗原或抗體的存在和數量。小鼠ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結如下：一、選擇試...
細胞基本結構組成詳述2024/6/12
細胞主要由細胞核與細胞質構成，表面有細胞膜。高等植物細胞膜外有細胞壁，細胞質中常有質體，體內有葉綠體和液泡，還有線粒體。動物細胞無細胞壁，細胞質中常有中心體，而高等植物細胞中則無。細胞并沒有統(tǒng)一的定義...
ELISA實驗稀樣本稀釋問題論述2024/6/3
酶聯免疫吸附測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay，ELISA）是免疫學和分子生物學中廣泛使用的實驗室技術，該測定依賴于抗原-抗體相互作用的原理，并利用酶和比色檢測來量...
蛋白質免疫印跡（Western blot）操作步驟2024/5/27
蛋白質免疫印跡（Westernblot）是一種常用于研究中分離和鑒定蛋白質的技術。WesternBlot原理與Southern或Northern雜交方法類似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺...
逆轉錄-聚合酶鏈反應 （RT-PCR）實驗操作步驟2024/5/17
逆轉錄-聚合酶鏈反應（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR）可以：(1）分析基因的轉錄產物；（2）獲取目的基因；（3）合成cDNA探針...
血清不穩(wěn)定原因及應對解決方案2024/5/13
血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷...
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