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PCR反應被污染操作規(guī)程2023/6/13
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規(guī)程，最da程度地降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn)。1.劃分操作區(qū)：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現(xiàn)wan全閉管操作，但無論是否能夠達到單...
PCR反應條件溫度和時間優(yōu)化設置2023/6/5
PCR反應條件的選擇技巧主要體現(xiàn)在溫度、時間和循環(huán)次數(shù)上，溫度過高，延伸時間不夠都會對實驗結果有很大的影響，以下總結方法技巧。溫度與時間的設置：基于PCR原理三步驟而設置變性-退火-延伸三個溫度點。在...
ELISA實驗顯色淡的原因及解決方案2023/5/29
ELISA實驗顯色淡的原因及解決方案：原因一：試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高。解決方案：盡量縮短運輸時間，夏季應放冰塊降溫。原因二：試劑盒未充分平衡。解決方案：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，...
PCR反應體系之引物條件把控2023/5/23
PCR（Polymerasechainreaction，聚合酶鏈式反應）是模擬體內DNA復制過程，對特定DNA序列進行大量擴增的一種技術。PCR反應是以4種dNTP為底物，引物引導，DNA聚合酶催化作...
PCR引物二聚體的重難點分析2023/5/15
引物二聚體作為PCR的副產(chǎn)物，有時候是主要產(chǎn)物充斥著我們的整個PCR實驗過程。引物二聚體其實就是一對引物或者引物自身的3’端部分堿基互補結合，在Taq酶的作用下從3’末端延伸所形成的小分子量的雙鏈DN...
細胞培養(yǎng)過程中污染源有哪些？2023/5/8
在培養(yǎng)細胞的實驗中，難免培養(yǎng)的細胞被污染了，得不到想要的實驗結果，那么你知道細胞培養(yǎng)的污染來源有哪些嗎？細胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：1、不潔的動物組織標本很多動物組織本該是無菌的(直接...
ELISA檢測方法的共同階段闡述2023/5/4
ELISA檢測是一種免疫檢測方法，通常用于測量生物樣品中的抗體或抗原，包括蛋白質或糖蛋白。像其他免疫檢測法一樣，它們依靠抗體與目標的結合來促進檢測。通常情況下，ELISA檢測是在96孔板中進行的，這種...
ELISA定性測定結果判斷方法分述2023/4/23
ELISA定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可...
ELISA試劑盒加樣操作重點關注方面2023/4/20
加樣技巧：1.保持每次加樣的兩步要有太大的差異，所以有條件的應該考慮使用排槍。2.槍內有氣泡應該先快速打空槍，將氣泡排出。3.板內有氣泡可以考慮用空槍將其吸出，不過小心不能碰到底板！4.盡量用排槍，做...
洗板機洗板關鍵點分析2023/4/11
洗板機洗板人為因素少，速度快，條件恒定，但是使用洗板機洗板時應注意以下三個關鍵點。1、洗滌參數(shù)主要的參數(shù)是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調為高，最好是比...
大鼠胰島素INS酶聯(lián)免疫試劑盒組成結構2023/3/20
elisa試劑盒試驗原理：試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再...
PCR反應條件提升細節(jié)2023/3/13
PCR反應條件：變性、退火、延伸、循環(huán)次數(shù)，PCR反應條件提升分析：1.變性：在第一輪循環(huán)前,在94℃下變性5-10min非常重要,它可使模板DNAwan全解鏈,然后加入TaqDNA聚合酶(hotst...
ELISA試劑盒包被選取抗體抗原向導2023/3/6
ELISA試劑盒包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時間，包被液的pH等應根據(jù)試驗的特點和材料的性質而選定?？贵w和蛋白質抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及...
PCR反應效率低值重新調整到理想范圍步驟2023/2/20
反應效率視為實時熒光定量PCR分析設計和優(yōu)化的關鍵因素。利用標準曲線(通過對目標模板進行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應的“健康”標志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩...
PCR實驗操作注意事項2023/2/10
實驗操作注意事項：盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應是謹慎認真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應該注意：1、戴一次性手套，若...
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