GUS染色液(即用型)
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 |
GUS染色液(即用型) | HR0258 | 50mL |
HR0258-100mL | 100mL |
產品描述
GUS (β -Galactosidase, β -半乳糖苷酶) 基因是存在于 E.coli 等一些細菌基因組內的編碼 β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶,該基因常作為融合標記用于植物轉基因分析和調控研究中。 GUS受體基因系統(tǒng)有表達 E.coli GUS 酶的穩(wěn)定性和在植物內的低活性,絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物,其反應產物可用多種方法檢測出來。5-Bromo- chloro-3-indolyl β-D-glucuronide,cyclo hexylammonium salt(簡稱為X-G luc或 X-GlcA)分子 量為 521.8,CAS 號為18656-96-7,是檢測大腸桿菌中GUS基因的底物,可快速檢測植物中GUS基因融合標記。
β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β -Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)簡稱為 GUS 染色液 ,其染色原理是適宜的反應條件下 β -葡萄糖苷酶(GUS)可將 X-G luc水解成藍色物質, 該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質 ,具有 GUS 活性的部位或位點呈現(xiàn)藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學活性分析、免疫分析以 及組織和細胞的組織化學染色 ,多用于轉基因植物的GUS基因表達分析。
該即用型試劑比常規(guī) GUS染色液操作簡便。
本產品僅用于科研領域,不用于臨床診斷。
自備用品
1.70%乙醇
2.去離子水
3.小瓶或多孔板、顯微鏡
產品性質
名稱 規(guī)格 | 50ml | 100ml | Storage |
HR0258(A): X-G luc | 1 支 | 2 支 | -20℃ 避光 |
HR0258(B): X-G luc Solution | 1ml | 2 × 1ml | RT |
配制 X-G luc (50x)溶液 :取B加至A中 ,充分溶解 ,即獲得X-G luc 溶液(50x)。 -20℃保存,1個月有效。避免反復凍融。 | |||
HR0258 (C): GUS Buffer | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
配制 X-G luc 染色液:取適量 X-G luc (50x)溶液和 GUS Buffer,按1:49比例充分混勻 , 該染色液現(xiàn)用現(xiàn)配,短期貯存可以4℃保存3天。 |
使用方法
1.取適量待染葉片等組織加入適量GUS染色液,使 GUS染色液浸沒組織。
2.37℃孵育1-24h ,隨著孵育時間的延長,藍色漸漸出現(xiàn),當表達量較高時,GUS活性的部位或位點呈現(xiàn)藍色或藍色斑點。
3.用 70%乙醇脫去樣本的葉綠素 ,一般樣本浸沒于乙醇1~3h,至陰性對照呈白色。如有必要可重復該脫色步驟 ,以便清除葉綠素。樣本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光學顯微鏡下觀察, 白色背景上的藍色即為GUS表達位點。
注意事項
1.配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存3 天。
2.由于組織特異性等原因 ,藍色顏色反應可能不一致,請做預實驗摸索實驗條件。
3.擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗根就可直接染色;煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉須在染色前切成薄片(1-3mm)。
4.當操作大的組織和樣品時 ,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞 ,建議采購常規(guī) GUS 染色液。
5.本產品僅作科研用途!
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