從唾液樣本到檢測(cè)結(jié)果：非洲豬瘟唾液檢測(cè)儀器的工作原理@2024全國包郵BK-PCR16，山東博科儀器廠家介紹，非洲豬瘟(ASF)唾液檢測(cè)是一種用于檢測(cè)豬只是否感染非洲豬瘟病毒(ASFV)的技術(shù)。與傳統(tǒng)的血液或組織樣本檢測(cè)不同，唾液檢測(cè)具有非侵入性、采樣簡便等優(yōu)點(diǎn)。以下是從唾液樣本到檢測(cè)結(jié)果的過程以及儀器的工作原理。

　　1. 唾液樣本采集

　　采樣方法：唾液樣本通常通過唾液收集器或棉簽采集。這些工具能夠有效吸收和保存豬只口腔中的唾液。采集過程中，確保使用無菌的工具，并記錄樣本信息(如采樣時(shí)間、地點(diǎn)、豬只編號(hào)等)。

　　樣本儲(chǔ)存：采集后的唾液樣本應(yīng)立即放置在冷藏條件下(通常在4°C)，以防止病毒降解。盡快送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后續(xù)處理，以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

　　2. 樣本處理

　　樣本預(yù)處理：在實(shí)驗(yàn)室，唾液樣本首先需要進(jìn)行預(yù)處理。這包括去除樣本中的雜質(zhì)和細(xì)胞成分，通常通過離心等方法進(jìn)行。預(yù)處理后，將唾液樣本與適當(dāng)?shù)木彌_液混合，以提取其中的病毒成分。

　　病毒提?。菏褂脤Ｓ玫奶崛≡噭┖袕耐僖簶颖局刑崛》侵挢i瘟病毒的遺傳物質(zhì)(DNA或RNA)。提取過程通常包括樣本裂解、去除雜質(zhì)、結(jié)合病毒遺傳物質(zhì)到提取柱中等步驟。提取過程中，必須在潔凈環(huán)境中操作，以防交叉污染。

　　3. 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)

　　PCR反應(yīng)混合物準(zhǔn)備：根據(jù)提取的病毒樣本，配制PCR反應(yīng)混合物。反應(yīng)液包括引物、探針、PCR緩沖液、酶和熒光染料。引物和探針是針對(duì)非洲豬瘟病毒特定序列設(shè)計(jì)的，能夠特異性識(shí)別病毒DNA或RNA。

　　PCR儀器設(shè)置：將反應(yīng)混合物加入PCR管中，并將其放置到實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中。PCR儀器通過溫度循環(huán)(包括變性、退火和延伸步驟)來擴(kuò)增目標(biāo)病毒遺傳物質(zhì)，同時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)變化。

　　熒光信號(hào)監(jiān)測(cè)：PCR儀器通過熒光染料標(biāo)記的探針檢測(cè)擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的熒光信號(hào)。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與樣本中病毒遺傳物質(zhì)的量成正比。儀器自動(dòng)記錄每個(gè)循環(huán)中的熒光信號(hào)，并生成擴(kuò)增曲線和Ct值(循環(huán)閾值)。

　　4. 結(jié)果分析

　　數(shù)據(jù)解讀：根據(jù)PCR儀器提供的Ct值，可以確定樣本中是否存在非洲豬瘟病毒。如果Ct值低于設(shè)定的閾值，則樣本為陽性;如果Ct值高于閾值，則為陰性。Ct值越低，說明樣本中病毒的濃度越高。

　　結(jié)果確認(rèn)：對(duì)于陽性結(jié)果，通常會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步的確認(rèn)測(cè)試，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序，對(duì)結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄，并生成檢測(cè)報(bào)告。

　　5. 數(shù)據(jù)記錄與報(bào)告

　　記錄：詳細(xì)記錄每個(gè)樣本的檢測(cè)結(jié)果、Ct值及其他相關(guān)數(shù)據(jù)，確保信息的完整性和準(zhǔn)確性。

　　報(bào)告：生成檢測(cè)報(bào)告，包含樣本信息、檢測(cè)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析。報(bào)告應(yīng)及時(shí)傳達(dá)給相關(guān)人員，幫助采取適當(dāng)?shù)姆揽卮胧?/p>

　　通過以上步驟，非洲豬瘟唾液檢測(cè)儀器能夠有效地從唾液樣本中檢測(cè)出病毒感染情況，為早期診斷和防控非洲豬瘟提供重要支持。