藥用蜂蜜的檢測方法

【性狀】本品為半透明、帶光澤、濃稠的液體，白色至淡黃色或橘黃色至黃褐色，放久或遇冷漸有白色顆粒狀結(jié)晶析出。氣芳香，味極甜。 相對密度 本品如有結(jié)晶析出，可置于不超過60℃的水浴中，待結(jié)晶全部融化后，攪勻，冷至25℃，照相對密度測定法（通則0601）項下的韋氏比重秤法測定，相對密度應在1.349以上。 【檢查】水分 不得過24.0%（通則0622折光率測定法進行測定）。 取本品（有結(jié)晶析出的樣品置于不超過60℃的恒溫水浴中溫熱使融化）1～2滴，滴于棱鏡上（預先連接阿貝折光計與恒溫水浴，并將水浴溫度調(diào)至40℃±0.1℃至恒溫，用新沸過的冷水校正折光計的折光指數(shù)為1.3305）測定，讀取折光指數(shù)，按下式計算： X=100-[78+390.7（n-1.4768）] X——樣品中的水分含量（％） n——樣品在40℃時的折光指數(shù) 酸度 取本品10g，加新沸過的冷水50ml，混勻，加酚酞指示液2滴與氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）4ml，應顯粉紅色，10秒鐘內(nèi)不消失。 淀粉和糊精 取本品2g，加水10ml，加熱煮沸，放冷，加dian試液1滴，不得顯藍色、綠色或紅褐色。 寡糖 取本品2g，置燒杯中，加入10ml水溶解后，緩緩加至活性炭固相萃取柱（在固相萃取空柱管底部塞入一個篩板，壓緊，置固相萃取裝置上。稱取硅藻土0.2g，加水適量混勻，用吸管加至固相萃取柱管中，自然沉降形成3mm厚的硅藻土層，打開真空泵吸引，稱取活性炭0.5g加10ml水攪拌，混勻，用吸管加入，在真空泵的吸引下使活性炭沉降，當水面接近活性炭層面時，再次注入0.2g用水混勻的硅藻土，在真空泵的吸引下，以1秒/滴的速度用25ml的水預洗，當液面到達柱面上2mm時關掉活塞，再壓入上篩板，備用）中，打開活塞，在真空泵的吸引下，使溶液通過柱子，待液面下降到柱面以上2mm時，用7%乙醇25ml洗脫，棄去洗脫液。再用50%乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，置65℃水浴中減壓濃縮至干，殘渣加30%乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取麥芽五糖對照品，加30%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0512）試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丙醇-水-三乙胺（60：30：0.7）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以苯胺-二苯胺-磷酸的混合溶液（取二苯胺1g，苯胺1ml，磷酸5ml，加丙醇^[1]至50ml，混勻），加熱至斑點顯色清晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品相應位置的下方，應不得顯斑點。 5-羥甲基糠醛 照液相色譜法（通則0512）測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%甲酸溶液（5：95）為流動相；5-羥甲基糠醛檢測波長為284nm，鳥苷檢測波長為254nm。理論板數(shù)按鳥苷峰計算應不低于3000。 對照品溶液的制備 取鳥苷對照品適量，精密稱定，加10%甲醇制成每1ml含鳥苷0.2mg的溶液，即得。另取5-羥甲基糠醛對照品適量，加10%甲醇制成每1ml含4μg的溶液，作為定位用。 供試品溶液的制備 取本品1g，置燒杯中，精密稱定，加10%甲醇適量溶解，并分次轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，精密加入鳥苷對照品溶液1ml，加10%甲醇至刻度，搖勻，即得。 測定法精密吸取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定；另取鳥苷對照品溶液，5-羥甲基糠醛對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，用以確定供試品色譜中5-羥甲基糠醛及鳥苷的色譜峰；以鳥苷對照品計算含量并乘以校正因子0.340進行校正，即得。 本品含5-羥甲基糠醛，不得過0.004%。 蔗糖和麥芽糖照〔含量測定〕項下方法測定，分別計算含量。本品含蔗糖和麥芽糖分別不得過5.0%。 【含量測定】照液相色譜法（通則0512）測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以Prevail Carbohyrate ES為色譜柱，以乙腈-水（75：25）為流動相；示差折光檢測器檢測。理論板數(shù)按果糖峰計算應不低于2000。 標準曲線的制備 分別精密稱取果糖對照品1.0g，葡萄糖對照品0.8g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，作為果糖、葡萄糖對照品儲備液。另精密稱取蔗糖對照品0.2g，麥芽糖對照品0.2g，置同一具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，搖勻，作為蔗糖、麥芽糖對照品儲備液。分別精密量取果糖、葡萄糖對照品儲備液和蔗糖、麥芽糖對照品儲備液，加40%乙腈配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖混合對照品溶液。每一濃度溶液配制中，儲備液的用量和稀釋體積見下表。 序號 果糖、葡萄糖 蔗糖、麥芽糖 稀釋體積 混合對照品溶液濃度（mg/ml） 對照品儲備液體積（ml） 對照品儲備液體積（ml） （ml） 果糖 葡萄糖 蔗糖 麥芽糖 1 1.0 0.125 5 10 8 0.5 0.5 2 3.0 0.5 10 15 12 1.0 1.0 3 2.0 0.5 5 20 16 2.0 2.0 4 5.0 2.0 10 25 20 4.0 4.0 5 3.0 1.5 5 30 24 6.0 6.0 精密吸取混合對照品溶液各15μl，注入液相色譜儀，分別測定。以對照品濃度為橫坐標，以峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。 供試品溶液的制備 取本品約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。 測定法 精密量取供試品溶液15μl，注入液相色譜儀，測定，按標準曲線法計算含量。 本品含果糖（C₆H₁₂O₆）和葡萄糖（C₆H₁₂O₆）的總量不得少于60.0%，果糖與葡萄糖含量比值不得小于1.0。