大腸桿菌破碎均質(zhì)機(jī),大腸桿菌破碎研磨均質(zhì)機(jī),大腸桿菌細(xì)胞破碎超聲波乳化機(jī),大腸桿菌破碎高壓均質(zhì)機(jī)高的轉(zhuǎn)速和剪切率對(duì)于獲得超細(xì)微懸浮液是zui重要的。根據(jù)一些行業(yè)特殊要求,依肯公司在ERS2000系列的基礎(chǔ)上又開發(fā)出ERX2000超高速剪切乳化機(jī)機(jī)。其剪切速率可以超過200.00 rpm,轉(zhuǎn)子的速度可以達(dá)到66m/s。在該速度范圍內(nèi),由剪切力所造成的湍流結(jié)合專門研制的電機(jī)可以使粒徑范圍小到納米級(jí)。
大腸桿菌破碎均質(zhì)機(jī) 細(xì)胞破壁 細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進(jìn)展,以前認(rèn)為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。
由于細(xì)菌、酵母、真菌、植物都有細(xì)胞壁,但成分不同,且同類細(xì)胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同,因此其細(xì)胞壁的堅(jiān)固程度不同,總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢(shì)。動(dòng)物細(xì)胞雖沒有細(xì)胞壁,但具有細(xì)胞膜,也需要一定的細(xì)胞破碎方法來破膜,達(dá)到提取產(chǎn)物的目的。
組織搗碎機(jī)
• 方法:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至zui慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。
• 特點(diǎn):一般用于動(dòng)物組織、植物肉質(zhì)種子、柔嫩的葉芽等,轉(zhuǎn)速可高達(dá)10000rpm/M以上。由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用。
勻漿器
• 方法:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎。勻漿器的研缽磨球和玻璃管內(nèi)壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離。制作勻漿器的材料,除玻璃外,還可以用硬質(zhì)塑料、不銹鋼、人造熒光樹脂等。
• 特點(diǎn):此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。
• 存在的問題:較易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀真菌,較小的革蘭氏陽性菌以及有些亞細(xì)胞器,質(zhì)地堅(jiān)硬,易損傷勻漿閥者,不適合用該法處理。
研磨
• 原理:將液氮預(yù)凍的樣本放入研缽內(nèi)研磨
• 特點(diǎn):多用于堅(jiān)硬植物材料,研磨時(shí)常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨劑,以提高研磨效果。
超聲波
• 原理:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,超聲對(duì)細(xì)胞的作用主要有熱效應(yīng),空化效應(yīng)和機(jī)械效應(yīng)。
• 特點(diǎn):
a) 處理少量樣本,操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性較好,節(jié)省時(shí)間;
b) 多用于微生物和組織細(xì)胞的破碎,如用大腸桿菌制備各種酶。
• 存在問題:
a) 超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團(tuán)能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活。
b) 大容量裝置聲能傳遞,散熱均有困難,應(yīng)采取相應(yīng)降溫措施。
c) 對(duì)超聲波敏感和核酸應(yīng)慎用。
高壓勻漿
• 方法:利用超高壓能量使樣品通過狹縫瞬間釋放,在剪切效應(yīng)、空穴效應(yīng)、碰撞效應(yīng)的作用下,使細(xì)胞破碎。全過程在4~6℃低溫循環(huán)水浴中進(jìn)行,保持原有物質(zhì)活性。
• 特點(diǎn):可連續(xù)操作,適合于處理大量樣本,主要用于從微生物樣本中提取蛋白等胞內(nèi)產(chǎn)物。
振蕩珠擊破碎
• 方法:將等體積的小量組織樣品與高密度的ZircoBeads放入可密封的2ml螺旋蓋微量管中,再加入緩沖液與穩(wěn)定成份到1.5ml的體積,用6500RPM振蕩機(jī)高速上下振動(dòng)8秒,休息8秒,再振動(dòng)8秒即可。
• 特點(diǎn):此方法是目前zui快且一次可處理zui多樣品的方法。一臺(tái)機(jī)器zui多可以在一天處理2400支樣品。對(duì)小量且多樣的人很方便。
目前利用IKNde超高速均質(zhì)機(jī)的破壁率比其他的機(jī)械方法要替提高80%的破壁率
的型號(hào)
大綱
標(biāo)準(zhǔn)流量(H2O) | 輸出轉(zhuǎn)速 | 標(biāo)準(zhǔn)線速度 | 馬達(dá)功率 | 進(jìn)出口尺寸 | |
型號(hào) | l/h | rpm | m/s | kW |
|
| 700 | 20000 | 66 | 2.2 | DN25/DN15 |
ERX 2000/5 | 1,500 | 15,750 | 66 | 7.5 | DN40 /DN 32 |
ERX 2000/10 | 5,000 | 10,950 | 66 | 22 | DN50 / DN50 |
ERX 2000/20 | 10,000 | 7,300 | 66 | 37 | DN80 /DN 65 |
ERX 2000/30 | 30,000 | 4,000 | 66 | 75 | DN150 /DN 125 |
ERX 2000/50 | 50,000 | 3,000 | 66 | 160 | DN200 /DN 150 |