高保真酶預混液基本信息匯總
高保真酶預混液是一種用于PCR擴增的即用型試劑,具有高保真性、高特異性和高效性,廣泛應用于分子生物學實驗。以下是其主要特點和應用場景:
1. 主要特點?
高保真性?:采用高保真DNA聚合酶(如Q5、Hieff Canace®等),其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,普通Pfu DNA聚合酶的9倍,顯著降低錯配率?。
熱啟動設計?:通過單克隆抗體抑制聚合酶活性,減少非特異性擴增,提高反應特異性?。
長片段擴增能力?:可擴增長達13 kb的DNA片段,適用于復雜模板的擴增?。
即用型設計?:預混液包含dNTPs、緩沖液和染料,只需加入引物和模板即可進行PCR,簡化實驗步驟?。
穩(wěn)定性好?:含有特異保護劑,反復凍融后仍能維持穩(wěn)定活性?。
2. 應用場景?
基因克隆與組裝?:適用于無縫克隆、多片段DNA組裝和定點突變等實驗?。
二代測序(NGS)文庫制備?:優(yōu)化用于NGS文庫擴增,提高文庫均一性和產量,尤其在GC富集區(qū)域表現(xiàn)優(yōu)異?。
復雜模板擴增?:適用于高GC含量、復雜二級結構的模板擴增?。
高通量實驗?:適用于批量樣本處理,提高實驗效率?。
3. 常見品牌與產品?
NEBuilder® 高保真 DNA 組裝預混液?:用于無縫組裝多個DNA片段,無需PCR純化步驟,適合合成生物學和多片段克隆?。
NEBNext® Ultra™ II Q5® 預混液?:專為NGS文庫擴增優(yōu)化,具有超高保真度和熱啟動特性?。
Hieff Canace® Gold PCR Master Mix?:即用型預混液,適用于長片段擴增和高保真PCR?。
4. 選擇建議?
實驗需求?:根據(jù)實驗類型(如克隆、測序或復雜模板擴增)選擇合適的產品?。
保真性要求?:對于高保真性要求的實驗,優(yōu)先選擇保真性更高的酶(如Q5或Hieff Canace®)?。
操作便捷性?:選擇即用型預混液,簡化實驗步驟,提高效率?。
高保真酶預混液憑借其高保真性、熱啟動設計和長片段擴增能力,已成為分子生物學實驗中的工具?。
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