三重四極桿質(zhì)譜儀在實際應用中展現(xiàn)了強大的分析能力和應用價值。以水產(chǎn)品中的藥物殘留分析為例,TQMS能夠準確檢測出水產(chǎn)品中的抗生素、農(nóng)藥等殘留物,為水產(chǎn)品的質(zhì)量安全提供了有力的技術(shù)支撐。此外,在生物學、醫(yī)學等領域中,TQMS也發(fā)揮著重要的作用。例如,在生物大分子的研究中,TQMS可以用于蛋白質(zhì)的序列分析、結(jié)構(gòu)表征等方面;在代謝組學研究中,它則能夠用于分析生物體內(nèi)代謝物的種類和數(shù)量。
三重四極桿質(zhì)譜儀的使用流程:
-選擇合適的樣品前處理方法:根據(jù)待測物的性質(zhì)和實驗目的,選擇適當?shù)姆椒▽悠愤M行前處理。這可能包括過濾、離心、萃取、稀釋等步驟。例如,在環(huán)境水樣的分析中,可能需要通過固相萃取來富集污染物。
-確保樣品的代表性和穩(wěn)定性:在進行前處理時,需要確保樣品能夠代表原始材料,并且在處理過程中保持其穩(wěn)定性,避免待測組分的損失或降解。例如,在生物樣本的分析中,可能需要快速冷凍并儲存于-80°C條件下,以防止樣品降解。
-制備標準曲線:為了準確定量,需要制備一系列濃度的標準品,以構(gòu)建標準曲線。這些標準品應覆蓋預期的濃度范圍,并使用與樣品相同的前處理方法進行處理。例如,在農(nóng)藥殘留分析中,需要用不同濃度的農(nóng)藥標準品來制備標準曲線。
-調(diào)整離子源參數(shù):根據(jù)樣品的性質(zhì)和待測物的結(jié)構(gòu),優(yōu)化離子源的參數(shù),如電噴霧離子化(ESI)的電壓、氣體溫度和流速。例如,對于極性較大的化合物,可能需要增加離子源的電壓來促進離子化。
-優(yōu)化質(zhì)量分析器參數(shù):調(diào)整四極桿的質(zhì)量篩選參數(shù),如質(zhì)量范圍、分辨率和掃描速度,以確保特異性和靈敏度。例如,在分析多肽時,需要仔細選擇四極桿的操作參數(shù),以分離相鄰質(zhì)量的干擾峰。
-設置碰撞能量:在三重四極桿質(zhì)譜儀中,第二個四極桿(碰撞池)的碰撞能量需要優(yōu)化,以獲得子離子譜圖。這通常通過逐步改變碰撞能量并觀察產(chǎn)物離子的穩(wěn)定性來實現(xiàn)。例如,在分析某種藥物代謝物時,需要找到使其特征碎片離子的碰撞能量。
-選擇合適的色譜柱和流動相:根據(jù)待測物的化學性質(zhì)和基質(zhì)復雜性,選擇適合的色譜柱(如反相C18柱)和流動相(如水和乙腈梯度)。例如,在多組分環(huán)境樣品的分析中,可能需要使用亞2微米填料的效液相色譜(UHPLC)柱以提高分辨率。
-優(yōu)化色譜梯度:通過調(diào)整流動相的梯度程序,優(yōu)化待測物的色譜分離效果。這需要考慮分析時間、分離度和峰形等因素。例如,在蛋白質(zhì)分析中,可能需要使用緩慢的梯度以獲得良好的分離效果。
-確保系統(tǒng)的穩(wěn)定性和重復性:液相色譜系統(tǒng)的穩(wěn)定性對后續(xù)的質(zhì)譜分析至關(guān)重要。需要定期檢查和維護色譜系統(tǒng),如更換老化的密封件和清洗柱頭濾器。例如,每次分析后都需要清洗進樣器和柱切換閥,以避免交叉污染。