隨著新春的假期漸漸遠去，我們正式迎來龍年工作日程。在這開年之際，愿所有的努力和汗水都能換來滿滿的收獲，今天我們就來一起迎接 CHO 細胞培養(yǎng)規(guī)模放大的挑戰(zhàn)，探索培養(yǎng)奧秘。
CHO 細胞，以其獨特的優(yōu)勢，在生物制藥領域中扮演著舉足輕重的角色。因其能夠快速、高水平地表達多種重組蛋白，使用懸浮培養(yǎng)工藝易于放大培養(yǎng)，CHO 細胞在生物制藥領域中被廣泛應用于生產治療型蛋白。但由于規(guī)模放大過程中各參數間的調整過于復雜，細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的放大仍然是一門通常依靠反復試驗來確定最佳工藝參數和操作策略的藝術。
關鍵工藝條件
通氣
在哺乳動物細胞生物反應器中，通氣是一個關鍵組成部分，特別是在高細胞密度下操作時，因為需要向細胞提供足夠的氧氣，同時必須去除二氧化碳，以防止其在培養(yǎng)液中積累。
圖 / 哺乳動物細胞培養(yǎng)中的常見通氣策略
氧氣
在 CHO 細胞培養(yǎng)中，溶氧水平通常保持在空氣飽和度的 10% 到 80% 之間。過高的氧濃度會導致活性氧 (ROS) 的積累，這會導致線粒體呼吸鏈和細胞內氧化還原的改變，最終導致細胞生長抑制和特異性生產力下降。另一方面，低氧條件也會誘導 ROS 積累。
氧氣傳質系數 (kLa) 用于衡量系統(tǒng)的氧氣傳輸能力。kLa 主要與單位體積功率輸入 (P/V) 和表觀氣體速度 (vs) 相關，其中 K 是常數，指數 α 和 β 分別約為 0.4 和 0.5，氣泡大小、混合速度、氣體流速、體積和生物反應器幾何形狀等工藝參數都會影響 kLa。
二氧化碳
在哺乳動物細胞培養(yǎng)中，溶解的二氧化碳 (pCO2) 水平通常保持在 4%-10% 的CO2飽和度 (30-70 mmHg)。高濃度的溶解 CO2 (150–200 mmHg) 會對多種哺乳動物細胞的細胞生長和生產力產生不利影響。在 CHO 細胞培養(yǎng)中，高 pCO2 水平可抑制細胞生長、細胞生產力并改變產品質量。
CHO-K1Q 細胞株推薦培養(yǎng)參數
• 復蘇時按 5*10^5 cells/ml 密度接種更利于細胞恢復；
• 傳代時細胞密度應控制在1.8-2.5x10^6 cells/m，避免高密度培養(yǎng)(> 3x10^6 cells/ml) 影響后續(xù)轉染效果；
• 傳代培養(yǎng)時需添加 4-8mM 谷氨酰胺培養(yǎng)；
• 培養(yǎng)條件：37℃，5%CO2, 26mm 125rpm 或 50mm 90 rpm 如搖床振幅不同，可按公式換算：離心力(FC)=轉速的平方(rpm2)x 振幅(φ)。
CHO-K1Q 培養(yǎng)雙姝
超人氣培養(yǎng)基 QuaCell® CellBest
QuaCell® CellBest Basal Medium & 007 Feed Medium 組合是樂純生物集團旗下康晟生物研發(fā)團隊通過 DoE 等統(tǒng)計學分析軟件，從培養(yǎng)基配方優(yōu)化、培養(yǎng)基配制、質量標準、細胞株適配性、產量及質量參數等方面進行測試和評估，推出的無血清，無動物源成分，化學成分限定的培養(yǎng)基和補料。
CHO 培養(yǎng)基新秀 QuaCell® CHO LeAd
QuaCell® CHO LeAd Medium 可為中國倉鼠卵巢細胞(CHO 細胞)的高密度增殖提供豐富的營養(yǎng)成分。此產品是一款無血清、無動物成分的化學限定培養(yǎng)基，適用于懸浮培養(yǎng) CHO 細胞以表達抗體及蛋白產物。此培養(yǎng)基配方中不含次黃嘌呤、胸苷及 L-谷氨酰胺，適合二氫葉酸還原酶、谷氨酰胺合成酶(GS)篩選系統(tǒng)。
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