本篇為此一次性使用系統(tǒng)干貨分享系列的第3篇
在生物制藥行業(yè)中，從R&D(研發(fā))到cGMP臨床試驗(yàn)，再到商業(yè)化生產(chǎn)，上游工藝中一次性系統(tǒng)的引入需要保證細(xì)胞保持卓越且穩(wěn)定一致的生長性能。
因此，對(duì)處在行業(yè)上游的生物技術(shù)企業(yè)而言，提供的工藝解決方案和產(chǎn)品需確保細(xì)胞穩(wěn)定一致的生長，這一點(diǎn)至關(guān)重要，并且，除了需保證細(xì)胞穩(wěn)定一致的生長外，為了提高最終藥品產(chǎn)量，行業(yè)目前正朝著提高細(xì)胞培養(yǎng)密度，增加蛋白生產(chǎn)滴度兩個(gè)方向發(fā)展，這也對(duì)相關(guān)生物技術(shù)企業(yè)提出了更高的要求。
近些年，隨著一次性技術(shù)進(jìn)入到細(xì)胞培養(yǎng)工藝中，市場上偶有發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長情況出現(xiàn)不一致的現(xiàn)象。經(jīng)研究，來自安進(jìn)公司的Hammond等人發(fā)現(xiàn)了一種會(huì)影響細(xì)胞生長的降解產(chǎn)物，那就是：雙1(2,4-二叔丁基苯基)磷酸酯(bDtBPP)。
帶你了解這個(gè)“神秘”的bDtBPP的
前世今生
一次性工藝袋中最核心的原材料便是生物薄膜，而薄膜的原材料是各種聚合物，通俗講就是塑料粒子。大量的塑料粒子通過共擠工藝?yán)^而形成工藝袋所需的生物薄膜。
通常情況下，為保護(hù)聚合物在薄膜擠出過程中和伽馬射線照射過程中不被氧化，生產(chǎn)商會(huì)在塑料粒子中加入抗氧化劑，從而防止薄膜在加工過程及使用過程中因降解造成的性能下降。
抗氧化劑分很多種，主要品類是受阻酚類和亞磷酸酯類，通常兩者會(huì)配合使用。其中顯著助影響細(xì)胞培養(yǎng)的是亞磷酸酯類抗氧化劑中的一種，叫TBPP，也就是168。事實(shí)上168本身并不會(huì)影響細(xì)胞生長和培養(yǎng)，但它經(jīng)過輻照后產(chǎn)生的子產(chǎn)物bDtBPP會(huì)顯著抑制細(xì)胞生長。
所以，為了保證膜材性能，抗氧化劑在生物薄膜中是必然存在的，但只要在原料選擇及制膜過程中嚴(yán)格控制168的濃度和配方，生產(chǎn)出的生物薄膜對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)便沒有影響。
看到這里，屏幕前的你可能會(huì)問“那你們樂純生物的LeKrius®生物工藝薄膜如何呢？”
LeKrius®生物工藝薄膜(以下簡稱“LeKrius®膜”)是樂純生物擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的一款生物薄膜，從原材料選擇到制膜配方再到生產(chǎn)供應(yīng)皆由樂純生物自主控制。
LeKrius®生物工藝薄膜
此款工藝薄膜在生產(chǎn)制造過程中不添加任何抗氧化劑，從源頭便避免了對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。除此之外，我們還對(duì)LeKrius®膜做了細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)和蛋白吸附實(shí)驗(yàn)，并就膜材對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響做了充分的驗(yàn)證。
LeKrius®生物工藝袋
今天，我們就來用Show一下具體的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)！
01
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
| 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
測試不同膜材對(duì)CHO K1及 CHO DG44 細(xì)胞生長密度及細(xì)胞活率影響
| 實(shí)驗(yàn)參數(shù)
細(xì)胞種類：CHO K1及 CHO DG44
培養(yǎng)基提取條件：37℃，3 days
面積體積比：3 cm2/mL
實(shí)驗(yàn)型號(hào)：
• LeKrius®膜
• 某同類型膜
• 陰性瓶子對(duì)照
| CHO K1細(xì)胞密度及活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
CHO K1細(xì)胞株培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
活細(xì)胞密度與瓶子培養(yǎng)基本持平 ，優(yōu)于某同類型膜；
在14天細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞活率接近。
| CHO DG44細(xì)胞密度及活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
以CHO DG44細(xì)胞株的活細(xì)胞密度、細(xì)胞活率數(shù)據(jù)來看，使用LeKrius®?膜進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)性能充分匹配工藝需求；LeKrius®?膜可保持較高細(xì)胞活率，并不會(huì)隨培養(yǎng)時(shí)間發(fā)生明顯變化。
02
蛋白吸附實(shí)驗(yàn)
| 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
通常情況下，培養(yǎng)基里會(huì)有很多蛋白添加，如果可以減少吸附，將會(huì)保證細(xì)胞培養(yǎng)效率
| 實(shí)驗(yàn)參數(shù)
①以膜材制成2L儲(chǔ)液袋，經(jīng)25-40kGy伽馬輻照；
?、跍y試5.0 mg/mL的BSA溶液蛋白濃度；
?、蹖SA溶液加入儲(chǔ)液袋中，面積體積比為3 cm2/mL;
④條件為37±0.5℃的環(huán)境下分別放置5小時(shí)，1天，3天，1周；
?、萑〕龊螅瑴y試儲(chǔ)液袋中BSA溶液的蛋白濃度
| 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
| 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
?、貺eKrius®膜蛋白吸附率極低，可忽略不計(jì)；
?、谝后w接觸層ULDPE業(yè)界化學(xué)惰性良好，蛋白吸附極低；
?、畚讲粫?huì)隨時(shí)間延長而增加；
從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，LeKrius®膜不管從細(xì)胞培養(yǎng)密度、細(xì)胞培養(yǎng)活率還是蛋白吸附率來看，都擁有優(yōu)異的性能表現(xiàn)。
通過以上介紹及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果，相信大家一定了解膜材的選擇對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)產(chǎn)生的影響如何。
作為中國較早一批專注于生物制藥產(chǎn)業(yè)鏈上游一次性耗材、設(shè)備及解決方案的服務(wù)商，樂純生物始終堅(jiān)持以科研為導(dǎo)向，發(fā)展至今已形成SUS、過濾純化及細(xì)胞培養(yǎng)三大產(chǎn)品體系。
針對(duì)配液與儲(chǔ)液應(yīng)用，除現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品外，樂純生物還可以根據(jù)客戶不同的工藝應(yīng)用場景，匹配定制不同用途的一次性工藝袋，如下圖所示：
也可直接長按識(shí)別下方企業(yè)微信二維碼聯(lián)系產(chǎn)品專員進(jìn)行咨詢。
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