1、補(bǔ)體細(xì)胞毒分離法
采用特異性抗細(xì)胞表面標(biāo)記的抗體，結(jié)合具有該表面標(biāo)記的細(xì)胞，在補(bǔ)體的作用下，使具有該表面標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生溶解，將其從混合細(xì)胞群體中去除。
2、免疫磁珠分離法
磁性微珠是20世紀(jì)80年代初以高分子材料和金屬離子（如Fe3O4）為原料聚合而成的一種以金屬離子為核心、外層均勻地包裹高分子聚合體的固相微粒，即磁性微珠。在液相中，受外加磁場的吸引作用，磁性微珠可快速沉降。以磁性微珠為載體，包被上針對某種細(xì)胞表面抗原的特異性抗體即可制成免疫磁性微珠。
免疫磁性微珠主要用于細(xì)胞的分離和純化，其基本原理及步驟是：首先將抗特異細(xì)胞表面抗原的抗體致敏到磁珠上，待它與混合體系中的細(xì)胞反應(yīng)后，利用磁力的作用，使與致敏結(jié)合的細(xì)胞與其它物質(zhì)分離，達(dá)到純化、分離的目的。通常有二種分離方式：陽性分離和陰性分離。陽性分離是直接從細(xì)胞混合液中分離出靶細(xì)胞，陰性分離是利用磁珠去除無關(guān)細(xì)胞，使靶細(xì)胞得以分離。
免疫磁珠分離細(xì)胞方法簡便，快速，無需特殊的設(shè)備，且分離純度高，產(chǎn)率大，近年來已被廣泛應(yīng)用于人類各種細(xì)胞的分離，如T、B淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、造血祖細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞及胰島細(xì)胞、多種腫瘤細(xì)胞等。
近年來，人們又開發(fā)出與生物素結(jié)合的單抗-親和素/鏈霉親和素-生物素結(jié)合的磁性微珠的實(shí)驗(yàn)方法，這種方法旨在利用生物素-親和素間的高親和力和生物放大作用來增強(qiáng)磁性微珠與細(xì)胞的結(jié)合力，從而提高細(xì)胞的分離效率。為了對細(xì)胞分離效果迅速進(jìn)行分析，可將熒光素標(biāo)記（如FITC）標(biāo)記在親和素/鏈霉親合素表面，使所分離的細(xì)胞在流式細(xì)胞儀（FCM）上立即得到測定分析，從而省去了免疫熒光染色的時間。
目前，實(shí)驗(yàn)室針對此種細(xì)胞分離技術(shù)的常用儀器是磁性激活細(xì)胞分離器（magnetic activated cell sorter,MACS）。此裝置有一個強(qiáng)有力的*性磁鐵、幾個具有不同分離容量的含磁鐵基質(zhì)的分離柱（B1型可分離5×107細(xì)胞，柱體積2.8ml；B2型可分離1×108細(xì)胞，柱體積4ml；C型可分離2×108細(xì)胞，柱體積8ml）和生物素標(biāo)記的磁珠組成，磁珠直徑為50～150mm。分離柱在使用前以高壓滅菌。
3、流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞儀由激光光源系統(tǒng)，氣控單細(xì)胞層流系統(tǒng)，光檢測及信息處理系統(tǒng)和細(xì)胞分離純化系統(tǒng)組成。
其工作原理及特點(diǎn)為經(jīng)過熒光抗體染色的單細(xì)胞懸液和鞘液在氮?dú)鈮毫ο峦瑫r進(jìn)行流室，形式鞘液包裹細(xì)胞懸液的穩(wěn)定層流，由噴嘴高速射下（1000～5000個細(xì)胞/s），與垂直而來的激光束交匯。在混合細(xì)胞中，由于細(xì)胞大小、胞內(nèi)顆粒多少及DNA含量等不同，使激光產(chǎn)生不同的散射，分別由散射光檢測器接受；細(xì)胞上著染的熒光染料在激發(fā)光激發(fā)下，發(fā)射出熒光，由熒光檢測器接受，所有信號自動傳入電子計(jì)算機(jī)分析處理，迅速獲得細(xì)胞類群及其數(shù)量的信息。由高頻超聲振蕩器和極向偏轉(zhuǎn)板等構(gòu)成的細(xì)胞分離純化系統(tǒng)，在分析鑒別不同的細(xì)胞類群的基礎(chǔ)上，使帶有不同電荷的細(xì)胞滴通過電磁場時發(fā)生偏離，zui后將細(xì)胞分別收集于不同容器內(nèi)。
流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種對處在液流中的單個細(xì)胞或其它生物微粒（如細(xì)菌）等進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)，它將免疫熒光與細(xì)胞生物學(xué)、流體力學(xué)、光學(xué)和電子計(jì)算機(jī)等多種學(xué)科的*融為一體，進(jìn)行細(xì)胞和分子水平的基礎(chǔ)理論與臨床應(yīng)用研究。
將熒光標(biāo)記的單克隆抗體加入PBMC懸液內(nèi)，使二者特異性結(jié)合，通過流式細(xì)胞儀自動檢測，既可很快得到T、B細(xì)胞及其亞群百分率和值的有關(guān)數(shù)據(jù)，又能以每秒高達(dá)5000個細(xì)胞（18×106 細(xì)胞/h）的速度分離和收集無菌的淋巴細(xì)胞，純度可達(dá)90%～99%，細(xì)胞活性亦不受影響，可用于淋巴細(xì)胞的各種免疫生物學(xué)功能測定。