pH：多數(shù)細胞系在pH7.4下生長得很好。各細胞株之間，細胞生長pH值變化很小，一些正常的成纖維細胞系以pH7.4-7.7，轉(zhuǎn)化細胞系pH7.0-7.4更適合。據(jù)報道，上皮細胞可在pH5.5維持。為確定pH值，做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析

      緩沖：培養(yǎng)基要在兩種條件下有緩沖作用：①開式皿中，CO2的稀放引起pH升高；②在高細胞密度下，轉(zhuǎn)化細胞系大量產(chǎn)生CO2和乳酸，引起pH下降。為了穩(wěn)定pH值，可以加入緩沖物。

盡管碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)在pH下的緩沖能力差，但由于它毒性小，成本低，對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用，它仍比其他緩沖系統(tǒng)用得多。HEPES在pH7.2-7.6下緩沖作用強得多，現(xiàn)在廣泛采用的濃度是10mmol/L或20mmol/L。

      滲透壓：多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍。人細胞漿的滲克分子濃度是290mOsm/kg，因而推測這是體外人細胞的值，盡管這與其他細胞不同（如小鼠大約是310mOsm/kg）。實際上，多數(shù)細胞在260-320mOsm/kg之間*可行。

       溫度：除了溫度對細胞生長的直接作用之外，由于低溫下CO2溶解度增加，很可能由于緩沖劑的離子化和pKa上的變化，溫度也會影響pH。

       黏度：培養(yǎng)基的黏度主要受血清含量的影響，在多數(shù)情況下，對細胞生長沒什么影響?？墒?，每當(dāng)細胞懸浮液要攪拌時（如懸浮培養(yǎng)物被攪拌或者胰蛋白酶消化后解離細胞時），它變得重要了。若在攪拌條件下細胞受到損害，那么用羧甲基纖維素或聚已烯基吡咯烷增加培養(yǎng)基的黏度，可減輕細胞損害。在低血清濃度或無血清下，這特別重要。

       表面張力和泡沫：培養(yǎng)基的表面張力可用來促進原代外植物貼附到介質(zhì)上，但很少用某種方法控制它。

        泡沫作用還不清楚。泡沫使蛋白質(zhì)的變性速率增加。如果泡沫達到培養(yǎng)容器的頸部，增加了污染的危險。懸浮培養(yǎng)中，用含5%CO2的空氣在含血清培養(yǎng)基中鼓泡，會產(chǎn)生泡沫。加入硅油消泡劑降低表面張力，有助于防止泡沫生成。