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果膠甲酯酶比色法試劑盒主要用途
植物果膠甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過果膠甲酯酶和酒精氧化酶的酶偶聯(lián)反應系統(tǒng)中產生的甲醛，與N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙反應，酸性氧化后，產生藍色甲簪產物，采用比色法測定其峰值的變化，以此進行測算單位酶活性的經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種植物組織裂解懸液樣品的果膠甲酯酶活性及其抑制劑的檢測。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應優(yōu)化，檢測敏感。
果膠甲酯酶比色法試劑盒檢測原理
果膠甲酯酶（pectin methylesterase；PME；EC3.1.1.11），又稱為果膠酯酶（pectinesterase），是一種細胞壁相關的果膠水解（pectolytic）酶蛋白，分子量為34－37kDa，存在于所有植物組織中，以及植物病源菌（真菌和細菌）里。果膠（pectin）是細胞壁的主要結構元素，占35％的多糖。果膠是同型聚糖半乳糖醛酸（homogalacturonan；HGA）和鼠李聚糖半乳糖醛酸（rhmnogalacturonan；RG）的復合物。其中80％的同型聚糖半乳糖醛酸為甲基酯化。果膠甲酯酶通過使果膠去酯化（deesterification），產生水溶性的果膠酸（pectic acid）和甲醇。植物果膠甲酯酶分成2型：I型和II型。其功能在于參與植物發(fā)育、形態(tài)形成、成熟、細胞壁延展和穩(wěn)固、水果軟化脫落和衰老、防止感染等，以及細菌和真菌果膠降解等。果膠甲酯酶常用于果菜汁等的澄清、液化、和水果軟化和成熟。基于底物果膠，在果膠甲酯酶的催化下，產生果膠酸和甲醇，進而在酒精氧化酶（alcohol oxidase）的作用下，產生并收集甲醛（aldehyde），同時使用N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙（N-methylbenzothiazolinone-2-hydrazone；MBTH），在中性條件下，進行濃縮反應，酸化處理，在三價鐵氧化劑的參與下，形成藍色甲簪產物，在分光光度儀下（620nm波長），來定量分析果膠甲酯酶的總活性。果膠甲酯酶酶偶聯(lián)反應系統(tǒng)為：
pectin methylesterase
Pectin-COOCH3 + 2H2O → Pectin-COO－ + H3O－ + CH3OH
alcohol oxidase
CH3OH + O2 → H2C=O + H2O2
H2C=O + MBTH + Fe3+ → blue formazan dye
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