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超聲波提取法可提高黃酮的得率的實驗

時間:2012/12/26
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  超聲波法提取柿葉總黃酮。工藝流程:柿葉y粉碎y乙醇浸泡y超聲處理y離心y定容y測定。單因素實驗。1乙醇濃度對超聲波提取效果的影響。準確稱取柿葉粗粉2.0g,共6份,按料液比1B25,分別加入40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇,浸泡1h,超聲提取30min,提取液離心(4000r/min)10min,用少量70%乙醇洗滌藥渣后,離心5min.合并離心液置100ml容量瓶,加乙醇溶液定容,取0.5ml提取液按/1.2.20方法進行顯色反應(yīng),在510nm處測定吸光值。o料液比對超聲波提取效果的影響。準確稱取柿葉粗粉2.000g,共4份,按料液比1B10,1B15,1B20,1B25分別加入70%乙醇,以下操作同1.?提取時間對超聲波提取效果的影響。準確稱取柿葉粗粉2.000g,共4份,料液比1B25,浸泡1h后按選擇的提取時間15、30、45、60min進行超聲提取,以下操作同1.正交實驗。根據(jù)以上單因素實驗結(jié)果,選擇對實驗影響較大的3個因素各設(shè)置3水平,采用L9(33)正交實驗,以確定柿葉總黃酮物質(zhì)的*提取條件。常規(guī)回流法提取柿葉總黃酮測定吸光值為0.092,經(jīng)計算得總黃酮得率為2.00%。
  
  超聲波提取法單因素實驗結(jié)果:乙醇濃度對超聲波提取的影響。表明,隨乙醇濃度的增大,柿葉總黃酮的提取率也隨之增高;當乙醇濃度超過60%時,隨乙醇濃度的增高,柿葉總黃酮的提取率反而下降。這可能是由于隨乙醇濃度的增大,提取液中除黃酮外的其他物質(zhì)的提取率也隨之提高,從而影響黃酮類物質(zhì)的提取,造成柿葉總黃酮的提取率下降。料液比對超聲波提取的影響。由可知,柿葉總黃酮提取率隨料液比的增大而迅速增大;當料液比達到1B20時,總黃酮提取率的增加幅度明顯減緩。
  
  提取時間對超聲波法提取的影響。由可知,總黃酮提取率隨超聲時間的增加而呈上升趨勢,但增加的趨勢不很明顯,特別是當提取時間達到45min以上時,提取率基本無變化。料液比對超聲波提取的影響提取時間對超聲波提取的影響2.3正交實驗結(jié)果正交實驗表明(,2),影響柿葉黃酮類化合物提取率因素的順序為:B(料液比)>C(提取時間)>A(乙醇濃度),即料液比是影響柿葉總黃酮提取率的zui重要因素。從平均提取得率K值來看,以提取條件A3B3C3為*提取工藝,即乙醇濃度60%,超聲45min,料液比1:25。
  
  正交實驗結(jié)果實驗號乙醇濃度A料液比B提取時間C空白總黃酮得率M%11.4432121.6363133.042421232.13752321.77162312.156731322.81183232.3869312.464K12.0402.1302.021-K22.0211.9252.0472.073-K32.5412.5542.5412.516-R0.5200.5290.5200.495-2.4驗證實驗稱取柿葉干粉2.000g,以料液比1B25加入60%的乙醇,浸泡1h,進行超聲波提取45min,提取液離心(4000r/min)10min,用少量70%乙醇洗滌藥渣后,再次離心15min.合并離心液置100ml容量瓶,加乙醇溶液定容。取0.5ml提取液按/1.2.20項進行顯色反應(yīng),在510nm處測吸光值OD=0.172,柿葉總黃酮得率為3.54%,與正交實驗分析結(jié)果相符。
  
  超聲波提取法與常規(guī)回流法比較由可知,超聲波法柿葉總黃酮的提取得率提高77%,縮短提取時間195min,料液比(提取溶劑用量)降低一半。
  
  超聲波提取法與常規(guī)回流提取法情況對比提取方法時間Mmin料液比提取率M%常規(guī)回流法2401B552.00超聲波提取法451B25超聲波提取柿葉黃酮的*工藝條件是A3B3C3,即乙醇濃度60%,超聲時間45min,料液比1B25.與常規(guī)回流法相比,超聲波提取法可提高柿葉總黃酮得率77%,并且可大幅度縮短提取時間,降低提取溶劑的用量。因此,超聲波提取法具有提取效率高、成本低的明顯優(yōu)勢。

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