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當(dāng)前位置:中斯立孚(天津)生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>細(xì)菌凍干菌球凍干整體解決方案及案例見(jiàn)證
細(xì)菌凍干菌球技術(shù)是一種高效的微生物保存方法,能夠在長(zhǎng)期保存過(guò)程中保持菌種的活性和穩(wěn)定性。以下是細(xì)菌凍干菌球凍干的整體解決方案及成功案例見(jiàn)證,展示了該技術(shù)的應(yīng)用和優(yōu)勢(shì)。
菌液制備
選擇合適的培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),確保細(xì)菌處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
收集高濃度的菌體,通過(guò)離心分離獲得純凈的菌泥。
使用生理鹽水或特定的緩沖液對(duì)菌泥進(jìn)行洗滌,去除殘留培養(yǎng)基成分。
保護(hù)劑選擇與添加
選擇有效的保護(hù)劑,如脫脂乳、蔗糖、海藻糖等。海藻糖因其優(yōu)異的保護(hù)效果被廣泛應(yīng)用。
將保護(hù)劑與菌泥混合,形成均勻的菌懸液,保護(hù)劑濃度應(yīng)根據(jù)具體菌種進(jìn)行優(yōu)化。
預(yù)凍處理
將菌懸液置于低溫環(huán)境(如-70℃)進(jìn)行預(yù)凍,確保菌體迅速冷凍,形成均勻的冰晶結(jié)構(gòu)。
預(yù)凍時(shí)間一般為2-4小時(shí),確保菌懸液固化。
冷凍干燥
使用專業(yè)的冷凍干燥設(shè)備,在真空環(huán)境下進(jìn)行干燥處理。
控制升華溫度和時(shí)間,確保菌球內(nèi)部水分充分升華,形成干燥的菌球。
凍干時(shí)間一般為20小時(shí)左右,具體時(shí)間根據(jù)菌球大小和含水量進(jìn)行調(diào)整。
封裝與保存
將凍干后的菌球在真空或惰性氣體環(huán)境下進(jìn)行封裝,防止外界環(huán)境對(duì)菌球的影響。
保存于低溫(如4℃或-20℃)環(huán)境中,確保菌種的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。
某生物制藥公司采用細(xì)菌凍干菌球技術(shù)保存一種重要的益生菌菌種。通過(guò)優(yōu)化保護(hù)劑配方和凍干工藝,成功制備出高質(zhì)量的凍干菌球。以下是具體案例:
項(xiàng)目背景
該公司需要長(zhǎng)期保存一種用于腸道健康的益生菌,要求菌種在保存過(guò)程中保持高活性和穩(wěn)定性。
解決方案實(shí)施
選用脫脂乳和海藻糖作為保護(hù)劑,制備菌懸液。
采用納米材料進(jìn)行交聯(lián),對(duì)菌類進(jìn)行360度全立體保護(hù)。然后再用-196℃,液氮微球成型技術(shù)(設(shè)備:MS-2T),進(jìn)行微球定型。
凍干:在-70℃條件下預(yù)凍10分鐘,然后使用冷凍干燥機(jī)(LYO-20)進(jìn)行干燥處理,凍干時(shí)間為24小時(shí)。
凍干后的菌球在真空環(huán)境下進(jìn)行封裝,保存于4℃冰箱。
效果評(píng)估
經(jīng)過(guò)一年的保存,凍干菌球的存活率達(dá)到95%以上,菌種活性和穩(wěn)定性均滿足生產(chǎn)要求。
在實(shí)際應(yīng)用中,凍干菌球能夠快速?gòu)?fù)蘇,并保持原有的生理功能。
該案例充分證明了細(xì)菌凍干菌球技術(shù)在微生物保存中的高效性和可靠性,為生物制藥和微生物研究領(lǐng)域提供了重要的技術(shù)支持。
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