轉(zhuǎn)染都有哪些途徑可以實現(xiàn)？-技術(shù)文章-廣州市艾貝泰生物科技有限公司

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轉(zhuǎn)染都有哪些途徑可以實現(xiàn)？

發(fā)布時間：2023-2-27

超聲波與電磁波相似，可被反射、折射和聚焦，其不同之處在于：者傳播時需要彈性介質(zhì)，而后者則可在真空中自由傳播。在固體介質(zhì)中超聲波的縱向波和橫向波均可傳播，而在氣體和液體介質(zhì)中只有縱向波可傳播。紡織品染整加工一般為液液、液固相體系，因此對超聲波縱向波的研究更為重要。

　　轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù),它是研究基因表達(dá)調(diào)控，突變分析等的常規(guī)工具。細(xì)胞轉(zhuǎn)染分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時轉(zhuǎn)染是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，存在于游離的載體上，不整合到細(xì)胞的染色體上。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指DNA整合到宿主細(xì)胞的染色體中。

　　轉(zhuǎn)染途徑：

　　1.電穿孔法：

　　電穿孔靠脈沖電流在細(xì)胞膜上打孔而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。本法需用特殊設(shè)置(電穿孔儀)，把懸浮狀態(tài)的受體細(xì)胞和供體DNA共同放入皿中(或杯中)，再施以高壓電脈沖，能夠促進(jìn)DNA通過細(xì)胞膜而進(jìn)入胞內(nèi)，并可整合到細(xì)胞的DNA中，使細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。若轉(zhuǎn)移的DNA為帶有選擇標(biāo)記基因的質(zhì)粒，也可在選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行鑒定。

　　2.顯微注射

　　本法是借助顯微注射器直接把DNA注射入核內(nèi)，使之發(fā)生整合入受體細(xì)胞基因組中的技術(shù)。本技術(shù)需要有嚴(yán)密無菌的凈化室，以免敞開操作污染，同時要能有自動拉針儀以制備顯微針，一般用手動拉針器拉制時要能使針末端有一個0.6cm長的細(xì)部，太長易折斷，針尖開口為2-3μm間，針口小于1μm更佳，針尖開口大于5μm易刺傷細(xì)胞。

　　3.基因槍

　　基因槍依靠攜帶了核酸的高速粒子而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)?？梢詫⒋蠓肿訉?dǎo)入細(xì)胞。

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